检验标本采集手册
检验标本采集手册来源:杏软科技 | 作者:刘付凤
检验结果是临床医师在诊疗过程中所需要的重要信息,临床医师可以根据这些检验结果及病人的临床情况来区分疾病的不同阶段,观察疾病的变化,判断预后或观察疗效。所以分析前阶段样本的质量保证是直接关系到检验结果能否真实客观地反应患者当前病情的一个重要环节。
一、病人准备
1.病人状态
一般需在安静状态下采集标本,如患者处于高度紧张的状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。由于劳累或受冷等刺激、也可见白细胞的增高。运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响,如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高,有些恢复较慢,如ALT在停止运动1h后测定,其值仍可偏高30%~50%。
2.饮食
多数试验要求在采血前禁食12h,因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。
(1) 餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,进食高蛋白或高核酸食物,可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。进食高脂肪食物后采集的血液样本,其血清会出现浑浊,可影响许多检验测定的正确性。甚至喝代咖啡的饮料,可引起淀粉酶(AMY)、AST谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹时间过长,会使GLU,蛋白质降低,而胆红素升高。
(2) 高脂餐后2~4h采血,多数人ALP含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。
(3) 高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量。
(4) 高比例不饱脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。
(5) 含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。
食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。
(7) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加,长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。
吸烟:瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下。此外,儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高,血液学方面亦有变化,白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。
3.药物
药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。庆大毒素、氨?青毒素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加、维生素C可使血糖、胆固醇、甘油三脂、尿酸严重降低。
4.体位
体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素,在确立参考值时,应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异,故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。
5.时间
病人准备还应考虑病人的生物钟规律,特别是激素水平分析,如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高,排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高,血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。
二、标本采集
标本采集是直接关系检验结果的基本要素,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。
现将各种标本的采集要点分述如下:
(一) 血液标本
1.标本采集注意事项:
(1) 采静脉血时止血带结扎过久,可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加5%,铁增加6%,胆红素增加8%,乳酸则不能使用止血带。
(2) 血清标本应避免溶血。许多物质红细胞内和血清中(血浆)的含量是不一样的。如ALT红细胞内比血清高出数倍。血钾、AST高出几十倍,而HDH则高出百倍以上,一旦溶血,特别是严重溶血,造成血清(浆)中这些物质的测定值增高,干扰测定结果。
(3) 要特别注意采血不能在输液的同侧进行,更应杜绝在输液管内采血,因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高,如输K+、Glu时,可使所测K+、Glu明显增高),或使血液稀释结果偏低。
细胞培养的样品要采用无菌技术,防止污染。
(4) 标本采集后,必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名,且应当场核对无误。
(5) [b]采血顺序[/b] 血培养??血凝管??血常规管??血沉管??生化及其他管
注:血常规管不要在第一管采血,本次采血只有血常规项目除外。
血细胞分析:专用管抽血2mL,轻微颠倒5次,紫色管。
血沉: 即抽即送,及时摇匀,血液与抗凝剂比例为4:1,装0.4ml抗凝剂,抽血至2ml,轻微颠倒5次,黑色管。
凝血三项:放置时间不宜超过半小时,及时摇匀,血液与抗凝剂比例为9:1,装0.2ml抗凝剂,抽血至2ml,轻微颠倒5次,兰色管。
生化标本,一般应空腹抽血,电解质要另抽一支,3ml,速凝管,红色管。
免疫标本,3ml,速凝管,红色管。
输血标本,速凝管采血3mL,连同5%红细胞悬液,红色管。
必须指出的是,各种标本都必须严格贴好标签。
(二) 尿液标本
根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。
(1) 晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后收集第一次尿,可用尿常规检验。
(2) 随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。
(3) 餐后尿为收集进餐后2h尿,主要用于了解葡萄糖代谢情况,用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。
(4) 计时尿应于计时开始时排空尿液,然后于规定时间内至截止时间留尿,计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估,亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。
(三) 粪便标本
采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度,且立即送检,立即检查,如检查蛲虫则不必送检粪样,而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围,可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表,一般以无滤漏容器留取5~10g即可。
(四) 脑脊液、浆膜腔液、关节液
均由临床医师穿刺采样,检验科应提供专用的各种试管或容器,及时送送检。
(五) 痰液标本
采集晨间第一口痰,多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口,经深呼吸数次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前,如已用药,则应选血液药物浓度最低水平时采样。
(六) 阴道分泌物
由妇产科医师采样后即时送检,否则影响滴虫动力,易于漏检。
(七) 其他标本
根据具体检验项目而定,临床医师在开申请单前,应同检验科相关部门联系并询问详细后,注明检查要求,再采样并及时送检。
总之,各种检验标本的采集合适与否,直接关系检验质量,应予以重视。
三、标本保存和运送
标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响,可能使检验结果受或大或小的误差,因此必须正确掌握标本保存和运送。标本采集后尽量立即送检,如在室温放置时间过长会造成血液成分的变化(如血糖及酶活性降低),也可造成溶血现象。
(1) 采样后须立即送检的常规项目:血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养,特别是厌氧菌培养。
(2) 采样后0.5h内送检的常规项目:血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。
(3) 采样后1~2 h内送检的常规项目:各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。 真空采血管的分类、添加剂原理及作用
真空采血器由真空采血管、采血针(包括直针和头皮采血针)、持针器三个部分组成。真空采血管是其主要组成部分,主要用于血液的采集和保存,在生产过程上预置了一定量的负压,当采血针穿刺进入血管后,由于采血管内的负压作用,血液自动流入采血管内;同时采血管内预置了各种添加剂,完全能够满足临床的多项综合的血液检测,安全、封闭、转运方便。
真空采血管一般分为以下几种:
1.无添加剂的干燥空管:采血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂(硅油)。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固,等血清自然析出后,离心使用。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。
2.促凝管:采血管内壁均匀涂有防止挂壁的硅油,同时添加了促凝剂。促凝剂能激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变成不可溶性的纤维蛋白聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块,如果想快点出结果时,可采用促凝管。一般用于急诊生化。
3.含有分离胶及促凝剂的采血管:管壁经过硅化处理,并涂有促凝剂可加速血液的凝固,缩短检验时间。管内加有分离胶,分离胶与PET管具有很好的亲和性,确实起到隔离作用,一般即使在普通离心机上,分离胶能将血液中的液体成分(血清)和固体成分(血细胞)彻底分开并积聚在试管中形成屏障。离心后血清中不产生油滴,因此不会堵塞机器。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。
4.管内含有抗凝剂的采血管:
1)含有肝素钠或肝素锂的采血管:,肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,带有强大的负电荷,具有加强抗凝血酶III灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而阻止凝血酶的形成,并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。肝素管一般用于急诊生化及血流变的检测,是电解质检测的最佳选择,检验血标本中的钠离子时,不能使用肝素钠,以免影响检测结果。也不能用于白细胞计数和分类,因肝素会引起白细胞聚集。
2)含有乙二胺四乙酸以及其盐(EDTA—)的采血管:乙二胺四乙酸是一种氨基多羧基酸,可以有效地鳌合血液中的钙离子,鳌合钙会将钙从反应点移走将阻止和终止内源性或外源性凝血过程,从而防止血液凝固,与其他抗凝剂比较而言,其对血球的凝集及血细胞的形态影响较小,故通常使用EDTA盐(2K、3K、2Na)作为抗凝剂。用于一般血液学检查,不能用于血凝、微量元素及PCR检查。
3)含有柠檬酸钠抗凝剂的采血管:柠檬酸钠通过作用于血样中钙离子鳌合而起抗凝作用,国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐为3.2%或3.8%,抗凝剂与血比例为1:9,主要用于纤溶系统(凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血酶时间、纤维蛋白原)。采血时应注意采足血量,以保证检验结果的准确性,采血后应立即颠倒混匀5-8次。
4)含有柠檬酸钠,柠檬酸钠的浓度为3.2%(0.109mol/L)和3.8%,其抗凝剂与血液的体积比为1:4,一般用于血沉检测,抗凝剂比例过于偏高时,血液被稀释,可使血沉加快。
5)管内含有草酸钾/氟化钠(1份氟化钠3份草酸钾):氟化钠是一种弱效抗凝剂,有良好的防止血糖降解作用,是血糖检测的优良保存剂,使用时应注意缓慢颠倒混匀。一般用于血糖检测,不能用于尿素酶法测定尿素,也不能用于检测碱性磷酸酶和淀酚酶 真空采血管,可能引起的危险与解决措施
1937年发明真空采血管,1943年在欧美开始流通,随之在实践使用中不断的日趋完善,1964年间真空采血管在日本登场,1971年在日本正式使用。在改革开放以后流人我国,九十年代部分医院开始使用,现今国产的真空采血管己占医疗市场的主导地位。高品质的国产真空采血管逐步替代进口同类产品,有的公司产品己打入国际市场。真空采血试管日渐普及,逐渐的代替注射器采血的方式,更加规范了采血技术,提高了检测标本质量与速度。2004年高桥胜幸报导了由于真空采血管内压和血管内压之间有压差的变动,已采取的血液有可能向血管内逆流而有感染危险的可能性。日本从1971年开始使用真空采血管至今有35年的历史,没有发生过因真空采血而引起感染的病例。2004年胜田逸郎等报告了从部分真空采血管检出粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens〕,如果血液逆流有感染危险性的存在,更加安全的采血技术引起各界的关注。本文介绍如何防止血流逆流〔back f1ow):
为什么能引起血液逆流:真空采血管的“真空”是指完全无空气的状态,低于大气压态。真空采血管其压力(负压)的增减是根据采血量而设置的。
当套紧压脉带时,血管内压上升-采血针介入肘静脉后血液流入负压状态真空采血管内.预量负压耗尽采血结束,此时,血管内压=真空采血管内互!采血终了由于摘下驱血带血管内压迅速低下重于回到常压,此时,血管内压<真空采血管内压,有可能已泵取的血液再回到血管内的危险。
防止血液逆流的采血方法:(一)采血时取下驱血带.采取的血液避免接触采血针吐出的部分,(二)采血时不要取下驱血带,采取的血液避免接触采血针吐出的部分(采血中使管座向下,避免采血针吐出的部分和己采取的血液接触),这样都可以避免back flow。
蝶翼式采血双向针使用方法蝶翼双向采血针的塑胶管有较大的盲区部分,其优点能有效的阻止采血管内己采取的血向血管内逆流的危险性,其缺点盲区部分采血量不够准确。蝶翼采血针连接塑胶管最大限度的缩短减少采血量的误差。蝶翼采血针特别适用于婴幼儿和采血困难者。 学到了新东西,非常谢谢
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